مقدمه
سرطان تخمدان اپیتلیال، شایع‌ترین سرطان کشنده در زنان ایالات متحده است و کمتر از 40 درصد از بیماران مبتلا به سرطان تخمدان بهبود می‌یابند [1]. بیشترین میزان شیوع، در ایالات متحده، اروپای شمالی و شیوع کمتر در ژاپن و کشورهای در حال توسعه گزارش شده است [2]. سرطان تخمدان هشتمین سرطان شایع و دوازدهمین علت مرگ‌و‌میر در ایران است [3]. اکثر تومورهای بدخیم تخمدان نتیجه بی‌ثباتی ژنتیکی هستند. این تومورها معمولاً به‌سرعت رشد می‌کنند و به‌شدت پیشرونده می‌شوند و چون به‌سرعت از تخمدان‌ها، به‌‌ویژه صفاق و لوله‌های فالوپ خارج می‌شوند، معمولاً زمانی تشخیص داده می‌شوند که علاوه بر تخمدان، سایر قسمت‌ها را نیز درگیر کنند [4]. سرطان تخمدان اپیتلیال شایع‌ترین بدخیمی تخمدان است، زیرا تا زمان متاستاز بدون علامت باقی می‌ماند و بیش از دو‌سوم بیماران در مراحل پیشرفته بیماری تشخیص داده می‌شوند [5]. سرطان تخمدان اپیتلیال در سنین 56 تا 60‌سالگی شایع‌تر است. شیوع این بیماری با افزایش سن افزایش می‌یابد [6]. هورمون‌ها، رژیم غذایی، سابقه خانوادگی، آلاینده‌های محیطی، موقعیت شغلی و جهش‌های ژنتیکی نیز از عوامل خطر سرطان تخمدان هستند [7]. ژن SORT1 یک رمزگذار NTR3/Sortilin است که دارای 22 اگزون در انسان است و روی بازوی کوتاه کروموزوم 1، نزدیک به سانترومر (1p21.3-p13.1) قرار دارد. این ژن یک کپی از 7028 نوکلئوتید (NM002959.4) را رمزگذاری می‌کند که از آن پروتئینی با 831 اسید‌آمینه و وزن 100 کیلو دالتون (NP002950.3‌) ترجمه شده است [8].
 پترسن و همکاران نشان داد که نسخه‌‌هایی از ژن SORT1 درتیروئید، قلب، مغز، ماهیچه‌های اسکلتی، نخاع، جفت و بیضه‌ها وجود دارد، اما در بافت تخمدان یافت نمی‌شود. نمایه‌های بیان ژن در بافت سرطان تخمدان افزایش چهاربرابری دربیان ژن SORT1 در مقایسه با بافت غیر‌بدخیم تخمدان نشان داده است [9].
 گیاه زنجبیل با نام علمی Zingiber officinale متعلق به خانواده Zingiberaceae است. گیاهی دارویی که در سراسر جهان به عنوان یک ادویه مهم و همچنین در طب سنتی کاربرد فراوانی دارد و اسانس آن حاوی بیش از 46 ترکیب مختلف مانند shogaol ، gingerol، gingerdion، terpene و sesquiterpene است که اغلب دارای خواص آنتی‌اکسیدانی هستند [10]. طیف وسیعی از درمان‌های این گیاه شامل روماتیسم، تب، فشار خون، استفراغ، درد، عفونت، آسم، دیابت، بیماری‌های عصبی، مشکلات گوارشی، التهاب، سرطان و تقویت قوای جنسی است [11].
Gingerol از طریق مرگ طبیعی سلولی، از رشد و تکثیر سلول‌های سرطانی جلوگیری می‌کند و ظرفیت ضد‌التهابی زنجبیل با توانایی آن در مهار سرطان با کاهش استرس اکسیداتیو و القای مرگ سلولی طبیعی مرتبط است [12]. Quercetin به عنوان یکی از فلاونوئیدهای موجود در زنجبیل به دلیل فعالیت آنتی‌اکسیدانی قوی، نقش ایمنی سلولی را در برابر استرس اکسیداتیو ایفا می‌کند، به نظر می‌رسد این ترکیب نه‌تنها به دلیل اثر آنتی‌اکسیدانی خود از سلول‌ها در برابر آسیب رادیکال‌های آزاد محافظت می‌کند، بلکه باعث مرگ برنامه‌ریزی‌شده سلولی از طریق فعالیت اکسیداتیو وجلوگیری از تومورزایی می‌شود [13]. ترکیبات فعال این گیاه مانند gingerol و shogaol به‌خوبی قادر به مهار تولید پروستاگلاندین‌های التهابی، مهارکننده‌های اکسید نیتریک و حتی اینترلوکین‌های دخیل در التهاب هستند [14]. سیکلوکسیژنازها در تمام مراحل تومورزایی بدخیم مانند افزایش تکثیر سلولی، کاهش آپوپتوز، رگزایی و تحرک سلول‌های سرطانی نقش دارند. آنزیم‌های سیکلوکسیژناز عامل مهمی در ایجاد سرطان تخمدان هستند [15]. Gingerol و gingerdion با مهار آنزیم‌های سیکلوپیژناز، مهارکننده‌های قوی پروستاگلاندین‌ها هستند [11].
 اثر ضدسرطانی عصاره زنجبیل بر رده‌های سلولی سرطان‌هایی مانند روده بزرگ [16]، پوست [17]، کبد، سینه [18]، پروستات [19]، آندومتر [20] و تخمدان [21] گزارش شده است. هدف از این مطالعه بررسی اثرات ضدسرطانی عصاره زنجبیل بر بیان ژن SORT1 و زنده ماندن رده سلولی A‌2780‌s سلول‌های سرطانی تخمدان بود. 
مواد و روش‌ها
تهیه عصاره
حدود 500 گرم ریزوم تازه و درشت زنجبیل در پاییز تهیه شد. این گونه مورد تأیید کارشناس آزمایشگاه گیاهی دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی یزد واقع شد. بعد از شستن، مقداری از آن را پوست کنده و به قطعات نازک برش دادند. گیاه زنجبیل در فر با دمای 50 درجه سانتی‌گراد خشک و آسیاب شد. اتانول 80 درجه به پودر حاصل اضافه شد. محلول به مدت 3 روز با استفاده از آهن‌ربای مغناطیسی کاملاً مخلوط شد. سپس با کاغذ صافی Whatman 42 صاف شد. برای صاف کردن و تهیه عصاره‌های الکلی خام از قیف بوشنراستفاده شد و کلیه ذرات ریز گرفته شد. مایع به‌دست‌‌آمده برای تقطیر در دمای 78 درجه سانتی‌گراد قرار داده شد و الکل موجود در آن جدا شد. عصاره در شیشه درپوش اتوکلاو در دمای 4 درجه سانتی‌گراد نگهداری شد [22].
کشت سلولی
در این مطالعه از رده سلولی A2780s (انستیتو پاستور، ایران) استفاده شد. سلول‌ها در RPMI1640‌ (Inoclon ایران) حاوی 10 FBS درصد (Gibco ایالات متحده آمریکا) و 1 درصد آنتی‌بیوتیک Pensterep‌ (Inoclon ایران) کشت و در انکوباتور 37 درجه سانتی‌گراد با فشار 5 درصد CO2 انکوبه شدند.
 هر 48 ساعت، محیط کشت جایگزین شد. پس از رسیدن به سطح تراکم 70 درصد، عبور انجام شد. ابتدا محیط کشت سلول‌ها به‌آرامی بیرون ریخته و با PBS شسته شد. برای جداسازی سلول‌ها از سطح فلاسک، تریپسین اضافه شد. پس از جداسازی سلول‌ها، مقداری محیط کشت با FBS برای خنثی کردن اثر تریپسین اضافه شد و پس از سانتریفیوژ ( 1200دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه) محیط فوقانی دور ریخته شد و محیط جدید اضافه شد. 10 میکرولیتر محلول برای شمارش روی لام نئوبائر ریخته شد.
سنجش زنده بودن
پس از شمارش، 104×25 سلول در هر چاهک پلیت 24 چاهی کشت داده شد. پس از 24 ساعت انکوباسیون در شرایط بهینه، برای محاسبه IC50 (نیم حداکثر غلظت بازدارنده)، محیط حاوی عصاره زنجبیل با غلظت‌های 40، 60، 80 و 100 میکروگرم بر میلی‌لیتر به چاهک‌ها اضافه شد و سلول‌ها به مدت 24 ساعت انکوبه شدند. برای محاسبه زمان، محیط کشت حاوی عصاره زنجبیل با غلظت مناسب (با توجه به درصد زنده ماندن سلول‌ها در هر غلظت) به چاهک‌ها اضافه شد و سلول‌ها به مدت 24، 48 و 72 ساعت انکوبه شدند. چاهک‌های گروه کنترل به مدت 24 ساعت با محیط کشت تیمار شدند.
پس از مدت‌زمان مورد‌نظر، سلول‌ها توسط PBS و تریپسیناسیون از سطح صفحه جدا شدند. پس ازسانتریفیوژ، 10 میکرولیتر از سوسپانسیون سلولی برای شمارش روی لام نئوبائر ریخته شد.
از محیط RPMI1640 به عنوان حلال برای تهیه غلظت‌های مورد‌نظر استفاده شد. تمام آزمایش‌ها حداقل سه بار تکرار شده‌اند.
استخراج RNA
1 میلیون سلول در هر چاهک پلیت 6 چاهی کشت داده شد. سلول‌ها با 60 میکروگرم در میلی‌لیتر عصاره زنجبیل به مدت 24 و 48 ساعت تحت تیمار قرار گرفتند. گروه کنترل به مدت 24 ساعت با محیط کشت تحت تیمار قرار گرفتند. سلول‌های سانتریفیوژشده پس از جدا شدن از سطح صفحه و پلاک‌های سلولی به‌سرعت به مخزن نیتروژن برای حفظ RNA منتقل شدند. استخراج RNA بر اساس دستورالعمل‌های کیت جداسازی RNA خالص (Roche) انجام شد. برای اطمینان از کیفیت RNA استخراج‌شده، الکتروفورز روی ژل آگارز انجام شد. وجود دو نوار شفاف روی ژل، سلامت RNA استخراج‌شده را تأیید کرد. برای بررسی کمی RNA استخراج‌شده، نسبت جذب نوری 260/280 و 260/230 (نانومتر) توسط نانو‌قطره به دست آمد. این نسبت در همه نمونه‌ها بین 1/7 تا 1/9 بود که نشان‌دهنده خلوص بالای RNA استخراج‌شده است.
سنتز c-DNA
سنتز cDNA بر اساس پروتکل Thermo Scientific Kit انجام شد. 1 میکرولیتر RNA، 1 میکرولیتر هگزامر تصادفی، 6 میکرولیتر آب Depce مخلوط و چرخانده شدند و در سیکلر حرارتی به مدت 5 دقیقه در دمای 65 درجه سانتی‌گراد انکوبه شدند. 4 میکرولیتر بافر واکنش 5x، 2 میکرولیتر dNTP، 1 میکرولیترآنزیم RT به آن اضافه شد و با D.D.W به حجم نهایی 20 میکرولیتر رسید. برنامه دما زمان به این صورت انجام شد: 25 درجه سانتی‌گراد به مدت 10 دقیقه، 42 درجه سانتی‌گراد برای 60 دقیقه و 65 درجه سانتی‌گراد به مدت 10 دقیقه. با استفاده از دستگاه نانوقطره، کیفیت cDNA سنتز‌شده تضمین شد.
زمان واقعی PCR
توالی ژن‌های SORT1 و GAPDH از سایت NCBI به دست آمد. پرایمرهای اختصاصی توسط برنامه gene runner طراحی و توسط NCBI بلاست شدند (جدول شماره 1).


برای Real-time PCR، از SYBR Green Master Mix (Applied Biosystems ،Warrington ،UK) استفاده شد. 10 میکرولیتر SYBR سبز، 1 میکرولیتر پرایمرهای فوروارد و معکوس از هر ژن با 5 میکرولیتر cDNA مخلوط‌شده و با D.D.W به حجم نهایی 20 میکرولیتر رسید. برنامه دما زمان به این صورت انجام شد: 95 درجه سانتی‌گراد برای 1 دقیقه، 95 درجه سانتی‌گراد برای 15 ثانیه و 60 درجه سانتی‌گراد برای 60 ثانیه. برای اطمینان از ویژگی محصول، منحنی ذوب بررسی شد. تمام آزمایشات در این مطالعه سه بار تکرار شد. بیان ژن با روش 2-∆∆Ct اندازه‌گیری شد.
تحلیل آماری
پس از اندازه‌گیری بیان ژن به روش 2-∆∆Ct و با استفاده از نرم‌افزار Excel، داده‌های به‌‌دست‌‌آمده از بخش Real Time PCR و سنجش زنده‌‌مانی با استفاده از نرم‌‌افزار SPSS نسخه 25، آزمون یک طرفه آنووا وتوکی انجام شد. نتایج به صورت میانگین و انحراف معیار محاسبه شد و P<0/05 به عنوان سطح معنی‌داری در نظر گرفته شد.
یافته‌ها
سنجش IC50
درصد سلول‌های زنده نسبت به گروه کنترل (میانگین± انحراف معیار) در گروه‌های تیمارشده با غلظت‌های 40، 60، 80 و 100 عصاره زنجبیل پس از 24 ساعت در تصویر شماره 1 نشان داده شده است.

با توجه به نتایج این نمودار، عصاره زنجبیل در غلظت‌های مختلف، درصد سلول‌های زنده را به ‌طور معنی‌داری نسبت به گروه کنترل کاهش داد و گروه‌های تیمار نیز تفاوت معنی‌داری داشتند. این نمودار نشان می‌دهد که عصاره زنجبیل به روشی وابسته به دُز، زنده ماندن سلول‌های A2780s را کاهش می‌دهد. IC50 عصاره زنجبیل در 24 ساعت، 76/8 میکروگرم در میلی‌لیتر است. غلظت 60 میکروگرم بر میلی‌لیتر که در آن 66 درصد سلول‌ها زنده مانده بودند برای بررسی بیشتر انتخاب شد.
بررسی زنده ماندن سلول‌ها در زمان‌های مختلف
نتایج موجود در تصویر شماره 2، درصد سلول‌های زنده (میانگین ± انحراف معیار) را درگروه‌های تیمارشده با غلظت‌های 60 میکروگرم بر میلی‌لیتر عصاره زنجبیل در 24، 48 و 72 ساعت نسبت به گروه کنترل نشان می‌‌دهد.

عصاره زنجبیل در زمان‌های مختلف، پس از افزودن عصاره، درصد سلول‌های زنده را نسبت به گروه کنترل به ‌طور معنی‌داری کاهش می‌دهد. گروه‌های تیمار نیز تفاوت معنی‌داری دارند. این نمودار نشان می‌دهد که عصاره زنجبیل زنده ماندن سلول‌های A2780s را به روشی وابسته به زمان کاهش می‌دهد. 
تجزیه و تحلیل بیان ژن SORT1
نتایج موجود در تصویر شماره 3 نشان می‌‌دهد که سطح بیان ژن SORT1 در سلول‌های تیمار‌شده با غلظت 60 میکروگرم بر میلی‌لیتر عصاره زنجبیل در 24 و 48 ساعت نسبت به گروه کنترل به ‌طور معنی‌‌داری کاهش یافته است.

بیان ژن در سلول‌های تیمارشده با عصاره زنجبیل به مدت 48 ساعت در مقایسه با سلول‌های تیمار‌شده با عصاره زنجبیل به مدت 24 ساعت به طور معنی‌داری کاهش یافت. جدول شماره 2 کاهش بیان ژن را در گروه‌های مختلف مقایسه می‌کند.


بحث
نتایج مطالعه حاضر نشان داد که عصاره الکلی تهیه‌شده از ریزوم زنجبیل تازه بر سلول‌های سرطانی تخمدان، رده سلولی A2780s اثرکشنده دارد. در این مطالعه مشاهده شد که با افزایش غلظت عصاره زنجبیل در 24 ساعت، درصد زنده ماندن سلولی نسبت به گروه کنترل به طور معنی‌داری کاهش یافت. علاوه بر این، با افزایش مدت‌زمان تیمار کردن سلول‌های سرطانی با غلظت 60 میکروگرم برمیلی‌لیترعصاره زنجبیل، درصد سلول‌های زنده نسبت به گروه کنترل به طور معنی‌داری کاهش یافت. نتایج Real Time PCR نشان داد که تیمار سلول‌های سرطانی با غلظت 60 میکروگرم بر میلی‌لیتر عصاره زنجبیل به مدت 24 و 48 ساعت بیان ژن SORT1 را نسبت به گروه کنترل به طور معنی‌‌داری کاهش داد.
در یک مطالعه بر روی سلول‌های سرطانی روده بزرگ، نتایج نشان داد که عصاره زنجبیل با توقف چرخه سلولی در مرحله G0/G1 و کاهش سنتز DNA، تکثیر را مهار کرده و باعث القای آپوپتوز در رده‌های سلولی HT29 و HCT116 می‌شود [16]. در مطالعه دیگری، 6-gingerol ،10-gingerol ،6-shogaol و 10-shogaol با مهار پروتئین‌های GSTλ و MRP1 از تکثیر سلول‌های سرطانی پروستات، رده‌های سلولی pc3R جلوگیری کردند [19]. در مطالعه دیگری، آن‌ها دریافتند که ترپنوئیدهای موجود در عصاره زنجبیل با فعال کردن مسیر P53 باعث القای آپوپتوز در رده‌های سلولی سرطان آندومتر می‌شوند. همچنین درمان سلول‌های سرطانی آندومتر با عصاره زنجبیل منجر به افزایش قابل توجه کلسیم داخل سلولی، کاهش پتانسیل غشای میتوکندری، افزایش بیان کاسپاز-3 و کاهش قابل توجه بیان Bcl-2 می‌شود [20].
ترکیب فنلی 6-gingerol از رشد و تکثیر سلول‌های سرطان پوست جلوگیری می‌کند و باعث القای آپوپتوز می‌‌شود. همچنین عملکرد میتوکندری را توسط ROS از طریق اختلال در نسبت Bax/BCL-2 تنظیم می‌‌کند و سیتوکروم C، کاسپاز 3 و 9 را افزایش می‌‌دهد و باعث القای آبشارهای کاسپاز می‌‌شود. بنابراین، 6-gingerol می‌تواند به طور مؤثر برای درمان سرطان پوست استفاده شود [17]. کیم و همکاران فعالیت ضد‌توموری و ضدرگزایی عصاره ریزوم زنجبیل را بر روی فاکتورهای VEGF و MTA1 که نقش عمده‌‌ای در رگ‌زایی در سلول‌های سرطانی ایفا می‌‌کنند، ارزیابی کردند و به این نتیجه رسید که gingerol موجود در عصاره ریزوم زنجبیل می‌‌تواند درکاهش تکثیرسلولی القاکننده VEGF و MTA1 مؤثر باشد [23]. gingerol‌ها به دلیل توانایی آن‌ها درجلوگیری از فعال شدن NF-kB، القای آپوپتوزو مهار تکثیر، تهاجم، متاستاز و رگ‌زایی، به عنوان عاملی در درمان سرطان امیدوارکننده هستند. gingerol‌های وابسته به دُز، سطوح شکستگی کاسپاز 9، 7، 3 و PARP را افزایش و بیان BCL2 را کاهش می‌دهند [24].
6-Shogaol و 6-gingerol از طریق مکانیسم‌های مولکولی مختلف، ازجمله مهار مسیرهای MAPK و PI3k/Akt و فعالیت‌های NF-kB و STAT3 برای سرکوب بیان MMP-2/-9 و uPA و انسداد رگ‌زایی به طور مؤثری از تهاجم و متاستاز کارسینوم سلولی کبدی جلوگیری می‌کنند [25]. عصاره متانولی زنجبیل دارای یک فعالیت بازدارنده بسیار مهم در برابر سلول‌های سرطانی کبد (HePG2) و سلول‌های سرطان سینه (MCF7) است. Gingerol و paradol نقش مهمی در مهار رشد سلولی از طریق واکنش کاهش اکسیداسیون با به دام انداختن رادیکال‌های آزاد ایفا می‌کنند که درنهایت باعث کاهش اکسیژن فعال می‌شود [18]. در مطالعه دیگری، عصاره زنجبیل فعالیت آنزیم MMP-9 را به روشی وابسته به غلظت مهار کرد و درنتیجه مهاجرت در سلول‌های سرطان سینه، رده سلولی MDA-MB-231 را مهارکرد. در این مطالعه، عصاره زنجبیل زنده ماندن سلول‌های MDA-MB-231 را به روشی وابسته به غلظت مهار کرد [26]. در پژوهشی دیگر، محققان با استفاده از روش سیلیکو نقش مفیدی از ترکیبات 6-gingerol و 6-shogaol را به عنوان مهارکننده‌های رشد و تعدیل‌کننده‌های مولکول‌های لنف‌زایی و رگ‌زاییVEGF-A, VEGF-C, Nrp2,Agiopoietin-2 PDGF-B, KDR, SERPINFI, poietin-2, PDGF-B, SERPINFI نشان دادند که در پیشرفت متاستاتیک سرطان پستان نقش دارند [27].
 لیانگ و همکاران در مطالعه‌ای گزارش کرد که 6-Shogaol باعث افزایش تولید ROS ، افزایش بیان Bax‌، 3 و Caspase9 و کاهش بیان cyclin D1، PCNA، IL-6 ،‌JAK و Bcl-2 در رده سلولی A2780 سرطان تخمدان شد. آن‌ها نشان دادند که 6-Shogaol با مهار انتقال STAT-3 در سلول‌های سرطانی تخمدان و مهار رشد سلول‌های سرطانی تخمدان باعث آپوپتوز می‌شود [21]. در یک مطالعه بر روی zerombon ترکیب دیگری که در زنجبیل یافت شد، نتایج نشان داد که zerombone با تحریک آپوپتوز بهتر از سیسپلاتین باعث مرگ سلولی در رده‌های سلولی سرطان تخمدان و دهانه رحم می‌شود. zerombon چرخه سلولی را در مرحله G2/M به روشی وابسته به دُز مهار می‌کند و به طور معنی‌داری سطح ترشح IL-6 را در رده‌های سلولی Caov-3 و HeLa کاهش می‌دهد [28]. راد و همکاران نشان داد که زنجبیل به طور انتخابی از رشد سلول‌های سرطانی تخمدان در مقایسه با سلول‌های اپیتلیال طبیعی تخمدان جلوگیری می‌کند. علاوه بر این، زنجبیل محصولات ژن تنظیم‌کننده NF-kB از جمله IL-8 و VEGF را که در تکثیر سلولی و رگ‌زایی سلولی نقش دارند، مهار می‌کند. با توجه به نتایج این مطالعه، 6-Shogaol فعال‌ترین ماده زنجبیل است که در سلول‌های سرطان تخمدان آزمایش شده است [29]. در مطالعه دیگری، محققان کاهش وابسته به دُز و زمان در تعداد سلول‌های سرطانی تخمدان تحت درمان با 10-gingerol را گزارش کردند. کاهش تکثیر سلول‌های سرطانی با افزایش درصد سلول‌ها در فاز G2 چرخه سلولی و کاهش درصد سلول‌ها در مرحله G1 همراه بود. سلول‌های سرطانی تخمدان کاهش بیان سیکلین A، B1 و D3 را پس از قرار گرفتن در معرض 10-gingerol نشان دادند [30]. در مطالعه دیگری که روی سلول‌های سرطانی تخمدان انجام شد، رشد سلول‌های رده سلولی SKOV-3 به طور معنی‌داری توسط عصاره زنجبیل مهار شد. نتایج این مطالعه نشان داد که بیان ژن Bcl-2 پس از تیمار با عصاره زنجبیل بیش از 0/4 برابر کاهش یافت و سطح بیان ژن P53 در سلول‌های تیمار‌شده با عصاره زنجبیل نسبت به گروه کنترل حدود 7 برابر افزایش یافت. بنابراین محققان به این نتیجه رسیدند که ژن P53 با حذف ژن Bcl-2 باعث تحریک آپوپتوز می‌شود [31].
 نتایج این مطالعه تحقیقات قبلی در مورد عصاره زنجبیل به عنوان یک ماده گیاهی مؤثر ضدسرطان و تأثیر آن را بر روی رده سلولی A2780s را تایید کرد.
نتیجه‌گیری
 عصاره زنجبیل دارای اثر مهاری بر بقای سلول‌های سرطانی تخمدان A2780s‌، به شکل وابسته به دُز و وابسته به زمان است. همچنین بیان ژن SORT1 را در سلول‌های A2780s کاهش می‌دهد. مطالعه حاضر تحقیقات قبلی را تأیید می‌کند و این نوید را می‌دهد که عصاره زنجبیل بر سلول‌های سرطانی تخمدان و رده سلولی A2780s اثر سمی دارد و از این ترکیب می‌توان برای تولید داروهای ضدسرطان تخمدان استفاده کرد.

اخلاقی
پیروی از اصول اخلاق پژوهش
این مطالعه در آزمایشگاه سلولی و رشدی گروه علوم پایه دانشکده علوم دامپزشکی دانشگاه اردکان (کد اخلاقی IR.YAZD.REC.1399.035) انجام شد.

حامی مالی
این تحقیق هیچ گونه کمک مالی از سازمان‌های تأمین مالی در بخش‌های عمومی، تجاری یا غیرانتفاعی دریافت نکرد.

مشارکت نویسندگان
 تمام نویسندگان در طراحی، اجرا و نگارش همه بخش‌های پژوهش حاضر مشارکت داشته‌اند.

تعارض منافع
بنابر اظهار نویسندگان این مقاله تعارض منافع ندارد.

تشکر و قدردانی
نویسندگان مقاله بر خود لازم می‌دانند از همکاری صمیمانه مسئول آزمایشگاه دانشگاه اردکان جناب آقای محسن رشیدی تقدیر و تشکر کنند.

Refrences
1.Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Cancer statistics, 2015. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 2015; 65(1):5-29. [DOI:10.3322/caac.21254] [PMID]
2.Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics, 2012. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 2012; 62(1):10-29. [DOI:10.3322/caac.20138] [PMID]
3.Arab M, Khayamzadeh M, Mohit M, Hosseini M, Anbiaee R, Tabatabaeefar M, et al. Survival of ovarian cancer in Iran: 2000-2004. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention. 2009; 10(4):555-8. [PMID]
4.Kurman RJ, Shih IM. Pathogenesis of ovarian cancer. Lessons from morphology and molecular biology and their clinical implications. International Journal of Gynecological Pathology. 2008; 27(2):151-60. [DOI:10.1097/PGP.0b013e318161e4f5] [PMID] [PMCID]
5.Zhao H, Yang Z, Wang X, Zhang X, Wang M, Wang Y, et al. Triptolide inhibits ovarian cancer cell invasion by repression of matrix metalloproteinase 7 and 19 and upregulation of e-cadherin. Experimental & Molecular Medicine. 2012; 44(11):633-41. [DOI:10.3858/emm.2012.44.11.072] [PMID] [PMCID]
​6.Pawlik P, Mostowska A, Lianeri M, Sajdak S, Kędzia H, Jagodzinski PP. Folate and choline metabolism gene variants in relation to ovarian cancer risk in the Polish population. Molecular Biology Reports. 2012; 39(5):5553-60. [DOI:10.1007/s11033-011-1359-0] [PMID]
7.Permuth-Wey J, Sellers TA. Epidemiology of ovarian cancer. Cancer Epidemiology. 2009: 472:413-37. [DOI:10.1007/978-1-60327-492-0_20] [PMID]
8.Petersen CM, Nielsen MS, Nykjær A, Jacobsen L, Tommerup N, Rasmussen HH, et al. Molecular identification of a novel candidate sorting receptor purified from human brain by receptor-associated protein affinity chromatography. Journal of Biological Chemistry. 1997; 272(6):3599-605. [DOI:10.1074/jbc.272.6.3599] [PMID]
9.Donninger H, Bonome T, Radonovich M, Pise-Masison CA, Brady J, Shih JH, et al. Whole genome expression profiling of advance stage papillary serous ovarian cancer reveals activated pathways. Oncogene. 2004; 23(49):8065-77. [DOI:10.1038/sj.onc.1207959] [PMID]
10.Amiri H, Mohammadi M, Sadatmand S, Taheri E. [Study the chemical composition of essential oil of ginger (zingiber officinale) and antioxidant and cell toxicity (Persian)]. Journal of Medicinal Plants. 2016; 2(58):89-98.[DOR:20.1001.1.2717204.2016.15.58.14.2]
11.Rehman R, Akram M, Akhtar N, Jabeen Q, Shah SA, Ahmed K, et al. Zingiber officinale Roscoe (pharmacological activity). Journal of Medicinal Plants Research. 2011; 5(3):344-8. https://www.researchgate.net/publication/265990258_Zingiber_officinale_Roscoe_pharmacological_activity#:~:text=Zingiber%20officinale%20is%20used%20as,hyperlipidemic%20and%20anti%2Demetic%20actions.
12.Moheghi N, Afshari JT, Brook A. [The cytotoxic effect of zingiber afficinale in breast cancer (MCF7) cell line (Persian)]. The Horizon of Medical Sciences. 2011; 17(3):28-34. http://hms.gmu.ac.ir/article-1-1282-en.html
13.Rahman S, Salehin F, Iqbal A. Retraction: In Vitro antioxidant and anticancer activity of young Zingiber officinale against human breast carcinoma cell lines. BMC Complementary and Alternative Medicine. 2012; 12:206. [DOI:10.1186/1472-6882-12-206] [PMID] [PMCID]
14.Lantz RC, Chen G, Sarihan M, Solyom A, Jolad S, Timmermann B. The effect of extracts from ginger rhizome on inflammatory mediator production. Phytomedicine. 2007; 14(2-3):123-8. [DOI:10.1016/j.phymed.2006.03.003] [PMID]
15.Masferrer JL, Leahy KM, Koki AT, Zweifel BS, Settle SL, Woerner BM, et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Research. 2000; 60(5):1306-11. [PMID]
16.Abdullah S, Abidin SA, Murad NA, Makpol S, Ngah WZ, Yusof YA. Ginger extract (Zingiber officinale) triggers apoptosis and G0/G1 cells arrest in HCT 116 and HT 29 colon cancer cell lines. African Journal of Biochemistry Research. 2010; 4(5):134-42. https://academicjournals.org/journal/AJBR/article-abstract/A5B217C11349
17.Nigam N, Bhui K, Prasad S, George J, Shukla Y. [6]-Gingerol induces reactive oxygen species regulated mitochondrial cell death pathway in human epidermoid carcinoma A431 cells. Chemico-Biological Interactions. 2009; 181(1):77-84. [DOI:10.1016/j.cbi.2009.05.012] [PMID]
18.El-Sayeh NE, Elsaadany S, Elmassry R, Hefnawy H. Cytotoxic effect of ginger root (Zingiber officinale) on liver and breast cancer. Zagazig Journal of Agricultural Research. 2018; 45(3):995-1001. [DOI:10.21608/zjar.2018.49149]
19.Liu CM, Kao CL, Tseng YT, Lo YC, Chen CY. Ginger phytochemicals inhibit cell growth and modulate drug resistance factors in docetaxel resistant prostate cancer cell. Molecules. 2017; 22(9):1477. [DOI:10.3390/molecules22091477] [PMID] [PMCID]
20.Liu Y, Whelan RJ, Pattnaik BR, Ludwig K, Subudhi E, Rowland H, et al. Terpenoids from Zingiber officinale (Ginger) induce apoptosis in endometrial cancer cells through the activation of p53. PloS One. 2012; 7(12):e53178. [DOI:10.1371/journal.pone.0053178] [PMID] [PMCID]
21.Liang T, He Y, Chang Y, Liu X. 6-shogaol a active component from ginger inhibits cell proliferation and induces apoptosis through inhibition of STAT-3 translocation in ovarian cancer cell lines (A2780). Biotechnology and Bioprocess Engineering. 2019; 24(3):560-7. [DOI:10.1007/s12257-018-0502-3]
22.Asadi T, Zanguee N, Mousavi SM, Zakeri M, Batvandi Z. [Antimicrobial effects of Alcoholic extract of Zingiber officinale on some pathogen bacteria of aquatic organisms (Persian)]. Journal of Applied Ichthyological Research. 2015; 3(2):59-68. http://jair.gonbad.ac.ir/article-1-82-en.html
23.Kim EC, Min JK, Kim TY, Lee SJ, Yang HO, Han S, et al. [6]-Gingerol, a pungent ingredient of ginger, inhibits angiogenesis in vitro and in vivo. Biochemical and Biophysical Research Communications. 2005; 335(2):300-8. [DOI:10.1016/j.bbrc.2005.07.076] [PMID]
24.Yadav VR, Prasad S, Sung B, Aggarwal BB. The role of chalcones in suppression of NF-κB-mediated inflammation and cancer. International Immunopharmacology. 2011; 11(3):295-309. [DOI:10.1016/j.intimp.2010.12.006] [PMID] [PMCID]
25.Weng CJ, Chou CP, Ho CT, Yen GC. Molecular mechanism inhibiting human hepatocarcinoma cell invasion by 6-shogaol and 6-gingerol. Molecular Nutrition & Food Research. 2012; 56(8):1304-14. [DOI:10.1002/mnfr.201200173] [PMID]
26.Al-Amin M, Eltayeb NM, Hossain CF, Khairuddean M, Rahiman SSF, Salhimi SM. Inhibitory activity of extract, fractions, and compounds from zingiber montanum rhizomes on the migration of breast cancer cells. Planta Medica. 2020; 86(06):387-94. [DOI:10.1055/a-1129-7026] [PMID]
27.Nanchari SR, Perugu S, Venkatesan V. Molecular docking studies to understand the potential role of ginger compounds (6-gingeroland 6-shogaol) on anti-angiogenic and anti-lymphangiogenic mechanisms. International Journal of Chemistry. 2020; 12(1):61-8. [DOI:10.5539/ijc.v12n1p61]
28.Abdelwahab SI, Abdul AB, Zain ZNM, Hadi AHA. Zerumbone inhibits interleukin-6 and induces apoptosis and cell cycle arrest in ovarian and cervical cancer cells. International Immunopharmacology. 2012; 12(4):594-602. [DOI:10.1016/j.intimp.2012.01.014] [PMID]
29.Rhode J, Fogoros S, Zick S, Wahl H, Griffith KA, Huang J, et al. Ginger inhibits cell growth and modulates angiogenic factors in ovarian cancer cells. BMC complementary and Alternative Medicine. 2007; 7(1):1-9. [DOI:10.1186/1472-6882-7-44] [PMID] [PMCID]
30.Rasmussen A, Murphy K, Hoskin DW. 10-Gingerol inhibits ovarian cancer cell growth by inducing G2 arrest. Advanced Pharmaceutical Bulletin. 2019; 9(4):685-9. [DOI:10.15171/apb.2019.080] [PMID] [PMCID]
31.Pashaei-Asl R, Pashaei-Asl F, Gharabaghi PM, Khodadadi K, Ebrahimi M, Ebrahimie E, et al. The inhibitory effect of ginger extract on ovarian cancer cell line: Application of systems biology. Advanced Pharmaceutical Bulletin. 2017; 7(2):241-9. [DOI:10.15171/apb.2017.029] [PMID] [PMCID]