BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
URL: http://imtj.gmu.ac.ir/article-1-2438-fa.html
، علیرضا محمدزاده*2 ، زهره معصومیان3
2- گروه میکروبشناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گناباد، گناباد، ایران ،
3- کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی گناباد، گناباد، ایران
اهداف: به‌طور کلی استخراج DNA از باکتریهای گرم‌مثبت بسیار مشکل و پرهزینه است. هدف از این مطالعه استفاده از پلیاتیلن گلیکول 200 به منظور استخراج DNA از باکتری گرم‌مثبت لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس و باکتری گرم‌منفی سودوموناس آئروژینوزا و انجام PCR روی آنها به منظور جست‌وجو به ترتیب برای ژنهای Lacto و ExoA بود.
مواد و روشها: در این مطالعه سویه استاندارد باکتری گرم‌مثبت لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس و باکتری گرم‌منفی سودوموناس آئروژینوزا به ترتیب بر روی محیط کشت MRS آگار و مولرهینتون آگار کشت داده شدند. سپس کلونی باکتری در بافر TE حل شد و با استفاده از PEG 200 استخراج DNA انجام شد. واکنش PCR بر روی ژنهای Lacto (اختصاصی لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس) و ExoA (سودوموناس آئروژینوزا) اختصاصی هر ارگانیسم انجام شد.
یافتهها: PCR روی ژنهای انتخاب‌شده برای هر اُرگانیسم انجام و وجود ژنهای Lacto با اندازه 231bp برای سویه استاندارد لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس و سویه لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس جداشده از لبنیات و ExoA با اندازه 396bp برای سویه استاندارد سودوموناس آئروژینوزا و سویههای بالینی سودوموناس آئروژینوزا روی ژل آگارز مشاهده شد.
نتیجهگیری: از آنجایی که استخراج DNA از باکتریهای گرم‌مثبت به دلیل داشتن دیواره بسیار محکم مشکل است، استفاده از PEG 200 میتواند روش بسیار مناسب، مقرون به‌صرفه و بسیار سریع و در دسترس برای استخراج DNA از باکتریهای گرم‌مثبت باشد. علاوه بر این، با استفاده از این روش میتوان به آسانی DNA باکتریهای گرم‌منفی و قارچها را نیز استخراج نمود.
دریافت: 1394/11/4 | پذیرش: 1395/1/31 | انتشار: 1395/2/1
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |